Ο Luigi ξεκινάει ονειρεμένες διακοπές με τον Mario και τους φίλους του όταν λαμβάνει μια πρόσκληση σε ένα πολυτελές ξενοδοχείο. Ωστόσο, το όνειρό του γίνεται γρήγορα εφιάλτης, όταν ο βασιλιάς Μπού αποκαλύπτει ότι όλα ήταν μια παγίδα για να αιχμαλωτίσει τον Mario και τους φίλους του. Με τη βοήθεια του καθηγητή E. Gadd για άλλη μια φορά, ο απρόθυμος και τρομαγμένος Luigi διασχίζει πάνω και κάτω τους στοιχειωμένους ορόφους του ξενοδοχείου σε μια προσπάθεια να τους εντοπίσει και τους σώσει.